微透析技術

微透析(Microdialysis)技術是一種將灌流取樣和透析技術結合起來並逐漸完善的一種從生物活體內進行動態微量生化取樣的新技術。具有活體連續取樣、動態觀察、定量分析、採樣量小、組織損傷輕等特點。可在麻醉或清醒的生物體上使用，特別適合於深部組織和重要器官的活體生化研究。目前已成為實驗神經生理學和神經化學的重要研究工具之一, 它可提供遞質釋放、攝取和代謝的必要資訊。

以透析原理作為基礎，通過對插入生物體內中的微透析探頭在非平衡條件下進行灌流，物質沿濃度梯度逆向擴散，使被分析物質穿過膜擴散進入透析管內,並被透析管內連續流動的灌流液不斷帶出，從而達到活體組織取樣的目的。

微透析系統裝置主要由微量泵、微透析探頭、收集器、連接管及配套設備組成。

1，微量泵以注射泵為佳,有利於減少恒流泵和蠕動泵的波動, 流速一般為1~5 μl/min。

2，微透析探頭有直線性探頭、環形探頭、同心型探頭等不同的類型(微透析管因實驗物件不同而形狀大小各異)；按照探頭的形狀分為穿顱探頭、U型探頭、I型探頭、環形探頭等。目前普遍應用的是同心型探頭，微透析探頭通常是由一管式半透膜與不銹鋼、石英或塑膠毛細管構成雙層管道；長度一般為1～10 cm。半透膜由再生纖維素、聚碳酸酯或聚丙烯腈製成, 載留分子量5～10 KD不等。實際應用需根據具體組織和待測物選擇不同的微透析探頭。

微透析技術最大的優點是可在基本上不干擾體內正常生命過程的情況下進行在體( in vivo)、即時( real time) 和線上(on line) 取樣, 特別適用于研究生命過程的動態變化。微透析技術的優點是活體取樣、動態觀察、定量分析、採樣量小、組織損傷輕等。該技術的另一大優點是樣品的採集與分析過程既可在位又可離位進行。

此外微透析技術的獨到之處是可以單獨取得細胞外液, 因此可對體內神經遞質的釋放量進行動態監測, 具有重要的生物學意義。微透析技術的缺點就是對取出的樣品進行準確可靠的校正，主要涉及到對探針的回收率的測定。探針回收率是指從灌流液中流出的待測組分與標準濃度之比的百分數。探針回收率是影響微透析結果的重要因素, 取決於取樣部位的生物學性質、透析膜的物理性質(材料、孔徑、長度及幾何形狀等)、待測物質的分子量、灌流速度、壓力、生物體本身的健康條件和生物節律等。